Pehea e hoʻoholo ai i ka noʻonoʻo kūpono?
No ka IPTG inducer (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), ʻoi aku ka kiʻekiʻe o ka ʻike, ʻoi aku ka maikaʻi.ʻO ka manaʻo maikaʻi loa e pili ana i nā kūlana hoʻokolohua kūikawā a me ka hopena induction makemake.
ʻO ka maʻamau, hoʻohana ʻia ka ʻike o ka IPTG ma ka laulā o 0.1-1 mM.Hiki i nā haʻahaʻa haʻahaʻa ke hōʻemi i nā hopena ʻino i ka ulu ʻana o ka cell a hiki ke hōʻemi i ka cytotoxicity ma muli o ka overexpression o nā protein target.Hiki ke hoʻonui ʻia ka nui o ka hoʻonui ʻana o ka cell metabolic, e pili ana i ka ulu ʻana o ka cell a me ka hōʻike ʻana.
ʻO ke ala e hoʻoholo ai i ka noʻonoʻo maikaʻi loa e hiki ke loiloi i ka pae hōʻike o ka protein target ma o ka hoʻokō ʻana i nā hoʻokolohua induction IPTG ma nā ʻano ʻokoʻa.Hiki ke hana ʻia nā hoʻāʻo moʻomeheu liʻiliʻi me ka hoʻohana ʻana i ke ʻano o nā ʻano IPTG (e laʻa me 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, a me nā mea ʻē aʻe) a hiki ke loiloi ʻia ka hopena hōʻike ma nā ʻano ʻokoʻa ma ka ʻike ʻana i ke kiʻekiʻe o ka hōʻike o ka protein target (e laʻa. blot or fluorescence detection).Wahi a nā hopena hoʻokolohua, ua koho ʻia ka manaʻo me ka hopena hōʻike maikaʻi loa ma ke ʻano he ʻano kūpono.
Eia kekahi, hiki iā ʻoe ke kuhikuhi i ka palapala pili a i ʻole ka ʻike o nā laboratories ʻē aʻe e hoʻomaopopo i ka laulā IPTG maʻamau i hoʻohana ʻia ma lalo o nā kūlana hoʻokolohua like, a laila koho a hoʻoponopono e like me nā pono hoʻokolohua.
Pono e hoʻomaopopo he ʻokoʻa paha ka manaʻo maikaʻi loa ma muli o nā ʻōnaehana hōʻike like ʻole, nā protein i hoʻopaʻa ʻia, a me nā kūlana hoʻokolohua, no laila ʻoi aku ka maikaʻi o ka loiloi ʻana i kēlā me kēia hihia.
Ka manawa hoʻouna: Sep-28-2023